Çfarë është analiza PCR?
Analiza e zinxhirit të polimerazës (PCR) është një teknikë laboratorike e dizajnuar për të identifikuar sasi të vogla të ADN-së në një mostër me një proces të njohur si përforcim . Gjatë amplifikimit të PCR, ADN-ja e interesit kopjohet në mënyrë të përsëritur derisa të ketë mjaft për analizë dhe zbulim. Për shembull, PCR mund të përdoret për të identifikuar sasi të vogla të ADN-së nga organizmat që shkaktojnë gonorre ose klamidia që janë të pranishme në një mostër të urinës .
Si funksionon PCR?
Hapi i parë në PCR është për të ngrohur mostrën në mënyrë që ADN-ja me dy bërthamë të ndahet në dy fillesa të vetme - kjo quhet denaturim . Pastaj, abletat , mostrat e shkurtra të ADN-së që përputhen me skajet e sekuencës së ADN-së me interes, kombinohen me ADN-në e mostrës. Pas kësaj, një polimerazë e ADN përdoret për të filluar replikimin e ADN-së në vendin e abetares. Së fundi, ADN-ja është ndezur për të ndarë fillesat edhe një herë, dhe procesi i tërë i PCR-së fillon përsëri.
Sasia e segmentit të ADN-së me interes të pranishëm në mostër rritet në mënyrë eksponenciale me çdo cikël PCR: një kopje bëhet dy, pastaj bëhet katër, pastaj bëhet tetë, etj; në mënyrë të përgjithshme, vetëm 20 deri në 40 cikle janë të nevojshme për të përcaktuar nëse ADN në fjalë është i pranishëm (dhe, nëse është, të sigurojë një mostër të mjaftueshme për analizë).
Të gjitha hapat e një reaksioni të zinxhirit polimerazë - denatizimi i ADN-së, aplikimi i primereve dhe shtrirja e ADN-së - ndodhin në temperatura të ndryshme, kështu që pas krijimit të përzierjes fillestare, hapat mund të kontrollohen përmes një procesi të njohur si termociklimi , në të cilën temperatura është mbajtur në nivelet e nevojshme për vetëm kohë të mjaftueshme për çdo hap për të marrë vendin.
Kështu, PCR është një mënyrë efikase për të amplifikuar sasinë e ADN-së të synuar në një provë të vetme me pak nevojë për ndërhyrje njerëzore.
Reaksioni i zinxhirit polimerazë përfaqësonte një revolucion në teknikën biologjike kur u zhvillua së pari në fillim të viteve 1980 dhe krijuesi i PCR Kary Mullis fitoi çmimin Nobel në Kimi për punën e tij në 1993.
Pse është PCR relevante për STD Testing?
Reaksioni i zinxhirit polimeraz dhe teknika të ngjashme si reagimi i zinxhirit ligaze , po provojnë të jenë me rëndësi në rritje për testimin e STD. Kjo është për shkak se këto teknika mund të identifikojnë në mënyrë të drejtpërdrejtë sasi të vogla të ADN-së virale ose ARN në mostrat. Identifikimi i kodit gjenetik të një patogjeni nuk kërkon që patogjeni të jetë gjallë, si kultura bakteriale ose kultura virale . Gjithashtu, nuk kërkon që infeksioni të ketë ndodhur një kohë mjaft të gjatë para se njerëzit të kenë zhvilluar një reaksion antitrupa të dallueshëm (siç është zbuluar nga ELISA ). Kjo do të thotë se teknikat e PCR ndonjëherë mund të zbulojnë sëmundje më herët se testet e tjera dhe pa aq shumë duhet të shqetësohen për mbajtjen e mostrave gjallë ose testimin në kohën e duhur.