Fluoreshencë në situ hibridizim
Hibridizimi i fluorescencit në situ (FISH) është një nga teknikat e përdorura për të kërkuar ADN-në e qelizave, duke kërkuar prezencën ose mungesën e gjeneve të veçanta ose pjesë të gjeneve.
Shumë lloje të ndryshme të kancerit lidhen me anomalitë e njohura gjenetike. Dhe nga gjenetik, ne nuk jemi vetëm duke folur për trashëgiminë. Gjatë një jete, qelizat mund të bëjnë gabime kur ndahen dhe rriten.
Mutacionet në ADN që janë të lidhura me kancer mund të grumbullohen në këto qeliza.
Si funksionon FISH?
FISH është një teknikë që përdor hetime fluoreshente për të zbuluar gjene të veçanta ose pjesë të gjeneve (sekuencat e ADN-së). Personeli i laboratorit të qendrës mjekësore dhe onkologët përdorin FISH për të ndihmuar në vlerësimin e pacientëve që mund të kenë kancer dhe nganjëherë për të monitoruar një pacient që tashmë është diagnostikuar me kancer dhe është trajtuar.
FISH mund të bëhet duke përdorur lloje të ndryshme të mostrave sipas vendndodhjes dhe llojit të kancerit të dyshuar: Qelizat tumorale të marra nga gjaku periferik, nga një biopsi e palcës së eshtrave ose nga biopsija e nymës limfatike, dhe indet e fiksuara formalisht parafine (kjo i referohet një mostër e indeve që përpunohet në laborator dhe të ngulitur në një lloj të dylli, duke e bërë atë më të ngurtë, në mënyrë që të mund të ftohet në seksione të hollë dhe të montuar për shikim nën mikroskop).
Çfarë kuptojnë mesazhet?
"H" në FISH i referohet hibridizimit.
Në hibridizimin molekular, një sekuencë e etiketuar e ADN-së ose RNA përdoret si një hetim - vizualizoni një tullë të kuqe Lego, nëse dëshironi. Sonda përdoret për të gjetur një tullë homologu Lego ose një sekuencë të ADN-së, në një mostër biologjike.
ADN-ja në mostrën tuaj është si grumbujt e tullave Lego dhe shumica e tullave në këto grumbuj nuk përputhen me hetimin tonë të kuq.
Dhe të gjitha tullat tuaja janë të organizuara me kujdes në 23 çifte të shtyllave të tullave - çdo grumbull është një nga kromozomet homologe të çiftëzuar, pak a shumë. Ndryshe nga tulla Lego, sonda jonë e kuqe e Lego është si një magnet i fortë dhe gjen ndeshjen e saj pa pasur nevojë të ndash nëpër grumbujt.
"F" i referohet fluoreshencës. Sonda jonë e kuqe mund të humbasë në grumbujt e tullave, prandaj është emërtuar me ngjyrë fluoreshente me ngjyrë në mënyrë që të shkëlqejë. Kur gjen ndeshjen e saj midis 23 shtyllave të çiftëzuara, një tag fluoreshent zbulon vendndodhjen e saj. Pra, tani mund të shihni se si hulumtuesit dhe klinicistët mund të përdorin FISH për të ndihmuar në identifikimin (ku grumbulli, ose kromozomi) një gjen të veçantë është vendosur për një individ të caktuar.
"I" dhe "S" qëndrojnë për in situ . Kjo i referohet faktit që tulla jonë e kuqe e Lego është në kërkim të ndeshjes së saj brenda mostrës që keni dhënë .
Çfarë lidhje me kanceret specifike të gjakut?
FISH dhe procedurat e tjera të hibridizimit në vend përdoren për të diagnostikuar një sërë anomalish kromozomal - ndryshime në materialin gjenetik, ndryshimet në kromozomet, përfshirë këtu:
Deletion - pjesë e një kromozomi është zhdukur
Translokimi - pjesë e një kromozomi thyen dhe shkopin mbi një kromozom tjetër
Inversioni - pjesë e një kromozomi thyen dhe riinfirmohet përsëri, por në mënyrë të kundërt
Kopjimi - pjesë e një kromozomi është e pranishme në shumë kopje brenda qelizës
Çdo lloj kanceri mund të ketë grupin e vet të ndryshimeve kromozomale dhe provat përkatëse. FISH jo vetëm që ndihmon në identifikimin e ndryshimeve fillestare gjenetike në një proces sëmundjeje si kanceri, por gjithashtu mund të përdoret për të monitoruar reagimin ndaj terapisë dhe remizimin e sëmundjes.
Ndryshimet gjenetike të zbuluara nga FISH ndonjëherë ofrojnë informata shtesë rreth asaj se si mund të sillet kanceri i një individi, bazuar në atë që është vërejtur në të kaluarën tek njerëzit me të njëjtin lloj kanceri dhe ndryshime gjenetike të ngjashme. Ndonjëherë FISH përdoret pasi të jetë bërë diagnoza, për të mbledhur informacion shtesë që mund të ndihmojë në parashikimin e rezultatit të pacientit ose trajtimin më të mirë.
FISH mund të identifikojë anomalitë kromozomale në leukemiet , duke përfshirë në leukimin kronike limfocitike (CLL). Për leuçeminë kronike limfocitike / Limfoma e limfociteve të vogla, FISH lejon pacientët të gjejnë kategorinë e tyre prognostiake: të mira, të ndërmjetme ose të varfra. Në leukeminë limfoblastike akute (ALL), gjenetika e qelizave leukemike mund t'ju tregojë rreth nivelit të rrezikut të kancerit dhe ndihmon në udhëzimin e vendimeve terapeutike.
Panelet FISH janë gjithashtu në dispozicion për limfomën, myelomën e shumëfishtë, çrregullimet proliferative të qelizave plazmale dhe sindromën mielodisplastike. Në rastin e limfomës së qelizave të mantelit, për shembull, ekziston një translokacion që FISH mund të zbulojë quajtur GH / CCND1 t (11; 14) që është e lidhur shpesh me këtë limfomë.
Pse FISH?
Një avantazh i FISH është se nuk duhet të kryhet në qelizat që janë në mënyrë aktive ndarëse. Testimi citogjenetik zakonisht zgjat rreth tre javë, sepse qelizat e kancerit duhet të rriten në enët laboratorike për rreth 2 javë para se të mund të testohen. Në të kundërt, rezultatet e FISH janë zakonisht të disponueshme nga laboratori brenda pak ditësh.
> Burimet:
> Testet citogjenetike të kancerit Kodet CPT.
> Fluorescence In Situ Hybridization (FISH). http://www.genome.gov/10000206#al-2.
> Fluorescence In Situ Hybridization (FISH). http://www.nature.com/scitable/topicpage/fluorescence-in-situ-hybridization-fish-327.
> Wolff DJ, Bagg A, Cooley LD, et al. Udhëzime për Fluoreshencën në Testimin e Hybridizimit të situatave në çrregullimet hematologjike. Gazeta e Diagnostikave Molekulare: JMD. 2007; 9 (2): 134-143.